用琼脂糖作支持物，先将抗原经电泳展开，然后在同一玻板上浇注含抗体的琼脂糖凝胶，在后一个凝胶中进行第二次电泳(与第一次电泳方向垂直)。这种方法实际上是在凝胶电泳后进行免疫电扩散。不同抗原形成互相独立的峰状免疫沉淀，至最适抗原/抗体比值处停止运动，沉淀峰的高度和面积与抗原量成比例关系。用此法可进行各种抗原的定量测定。