在细胞分选过程中挑战Glo-Germ技术进行气溶胶遏制

医学2020-10-22 23:42:08
导读流式细胞仪细胞分选仪产生的高压生物样品流的遏制在生物学上势在必行;必须减轻接触(潜在)传染因子的风险。随后,评估气溶胶遏制水平对于生

流式细胞仪细胞分选仪产生的高压生物样品流的遏制在生物学上势在必行;必须减轻接触(潜在)传染因子的风险。随后,评估气溶胶遏制水平对于生物安全保证至关重要。

来自国家生物防御分析和对策中心(NBACC)的一组研究人员开发了一种强大的分析方法,用于确定快速,经济且高效的细胞分选器气溶胶密封。这种新方法对行业现状提出了挑战--Glo-Germ珠子程序 - 虽然广泛使用,但有几个缺点。

Stephen Perfetto和团队成功开发出一种利用Cyclex-d撞击器和Dragon Green荧光微球珠子的新方法。其较小的取样要求和灵敏度使其成为标准Glo-Germ珠粒程序的替代试验。

Glo-Germ是否缺少标记作为有效的遏制测试?

现代细胞分选流式细胞仪配有重要的生物安全装置:气溶胶容纳系统。分拣机使用通过从喷嘴产生微滴喷射而实现的空气流分选方法。分选喷嘴的堵塞倾向于增加气溶胶形成的发生率,需要容纳雾化样品以减轻操作者暴露于感染因子的风险。

以这种方式生产雾化样品发生在失效模式(FM)期间,其描述了由于部分喷嘴阻塞和样品流中的偏差导致的细胞分选器的异常操作。根据最新的国际细胞分析促进会(ISAC)细胞分选生物安全标准,气溶胶控制必须通过几个间隔进行的分析验证。

最受欢迎的抑制测试措施是Glo-Germ珠子程序;该测定法测量高度荧光的三聚氰胺共聚物树脂珠粒的释放。从显微镜载玻片上收集逃离分选室的任何珠子,用于通过荧光显微镜进行计数。

尽管它很受欢迎,但该方法存在几个缺点。首先,冲击器使用不当 - 通常设计用于在琼脂平板上收集生物气溶胶用于生长分析。这确定截止直径或d50为0.65。当用于容器测试目的时,载玻片装置改变d50,随后导致低估逸出的气溶胶。最后,Aerotech冲击器造成的最大限制是需要彻底清洁,以避免可能产生误报的残留颗粒。

在分拣机故障期间是否有更好的方法来控制气溶胶喷雾?

为了解决这些缺点,该团队开发了一种新型细胞分选仪来检修Glo-Germ程序。该文章发表在Cytometry Part A:Journal of Quantitative Cell Science上,概述了使用配备有气溶胶粒子分析仪的BD FACSAria II模型细胞分选仪进行的Cyclex-d撞击器和Dragon Green(DG)珠子的替换程序。紫外激光。

将Cyclex-d撞击器放置在细胞分选器附近以在FM期间收集雾化样品。该团队将此程序与UV-APS空气动力学粒度分析仪和紫外线可激发染料进行了比较。这种类型的密封评估是一种实时方法,其提供立即确定颗粒计数的优点,但是具有费用的缺点。

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