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(一)碳水化合物的代谢试验

1.糖(醇、苷)类发酵试验 是鉴定细菌最主要和最基本的试验，特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。

2.氧化-发酵试验(O/F试验) 主要用于肠杆菌科细菌与非发酵菌的鉴别，前者均为发酵型，而后者通常为氧化型或产碱型。也可用于葡萄球菌与微球菌间的鉴别。

3.β-半乳糖苷酶试验(ONPG试验) 主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。

4.七叶苷水解试验　将待检菌接种于七叶苷培养基中，培养后观察结果。培养基变为黑色为阳性，不变色者为阴性。主要用于D群链球菌与其他链球菌的鉴别，前者阳性，后者阴性。也可用于革兰阴性杆菌及厌氧菌的鉴别。

5.甲基红试验 主要用于鉴别大肠埃希菌与产气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。此外肠杆菌科中沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性，而肠杆菌属、哈夫尼亚菌属则为阴性。

6.V-P试验 本试验常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的细菌，后者通常为阴性。

(二)蛋白质和氨基酸的代谢试验

1.吲哚(靛基质)试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。

2.硫化氢试验 主要用于肠杆菌科中属及种的鉴别。如沙门菌属、爱德华菌属、亚利桑那菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属细菌，绝大多数硫化氢阳性，其他菌属阴性。沙门菌属中也有硫化氢阴性菌种。

3.尿素分解试验 主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。奇异变形杆菌和普通变形杆菌脲酶阳性，另外雷氏普罗威登菌和摩根菌为阳性，而斯氏和产碱普罗威登菌阴性。

(三)碳源和氮源利用试验

1.枸橼酸盐利用试验 用于肠杆菌科中菌属间的鉴定。在肠杆菌科中埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌属和耶尔森菌属均为阴性，沙门菌属、克雷伯菌属通常为阳性。

2.丙二酸盐利用试验 用于肠杆菌科中属间及种的鉴别。克雷伯菌属为阳性，枸橼酸杆菌属、肠杆菌属和哈夫尼亚菌属中有些菌种也呈阳性，其他菌属均为阴性。

(四)各种酶类试验

1.氧化酶试验 主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前者为阴性，后者为阳性。奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。

2.过氧化氢酶试验(触酶试验) 革兰阳性球菌中，葡萄球菌和微球菌均产生过氧化氢酶，而链球菌属为阴性，故此试验常用于革兰阳性球菌的初步分群。