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(一)配料

按培养基处方准确称取各种成分，先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水，再加入各种成分，以防蛋白胨等粘附于瓶底，然后再以剩余的水冲洗瓶壁。

(二)溶化

将各种成分混匀于水中，最好以流通蒸气溶化半小时，如在电炉上溶化应随时搅拌，如有琼脂成分时更应注意防止外溢。溶化完毕，补足失去的水分。

(三)矫正pH

1.pH测定

取与标准管同口径的试管(通常用华氏试管)3支，于第1、3管各加入欲测定pH的的培养基5ml，并于第一管中加入0.2g/L的酚红0.25ml作为测定管，混匀;于第2管加入蒸馏水5ml，第4管为pH标准比色管。

2.pH的校正

若测定管过酸或过碱可用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸溶液矫正，直至颜色与标准管相同为止，加碱或加酸时要精确缓慢，每加1滴后要充分混匀，比色后再加第2滴(有时仅加半滴)准确记录加入的量。