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理想的分离方法应分离彻底、迅速;分离试剂和过程不影响反应平衡，而且效果不受反应介质因素的影响;操作应简单、重复性好以及经济。方法：

1. 第二抗体沉淀法：反应完成后加入二抗形成复合沉淀。为增强效果可加入一定量的与一抗同种动物的血清或IgG，或是将二抗与某些颗粒固相物连接。

2. 聚乙二醇(PEG)沉淀法：能非特异地沉淀抗原抗体复合物等大分子蛋白质，而不沉淀小分子抗原。当温度髙于30℃时，沉淀物易复溶。

3. PR试剂法 先将二抗与PEG按一定比例混合成悬液后进行试验。此法保留了二者的优点，节省了二者的用量，且分离迅速，简便。

4. 活性炭吸附法：活性炭可吸附小分子游离抗原或半抗原，而大分子蛋白(如抗体和免疫复合物)则留在溶液中。